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細(xì)胞培養(yǎng)之支原體檢測(cè)方法~支原體檢測(cè)培養(yǎng)法

更新時(shí)間:2022-03-17  |  點(diǎn)擊率:681

細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,由于實(shí)驗(yàn)環(huán)境、操作者鼻腔口腔、實(shí)驗(yàn)器材等很多地方都有支原體的存在。因此,細(xì)胞發(fā)生支原體污染的頻率很高。據(jù)美國(guó)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),細(xì)胞發(fā)生支原體污染的幾率在70%以上。

同時(shí),由于支原體直徑很小,僅在180nm~350nm之間,只有通過(guò)電鏡才能看到。因此,支原體污染不易被實(shí)驗(yàn)者肉眼發(fā)覺(jué)。而支原體污染是個(gè)循序的過(guò)程,普通抗生素對(duì)其無(wú)效。因此,被支原體污染的細(xì)胞會(huì)持續(xù)受到影響,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確。

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之前我們說(shuō)過(guò)兩種檢測(cè)方法:支原體常規(guī)PCR法和支原體檢測(cè)qPCR,今天介紹的是:支原體檢測(cè)方法之培養(yǎng)法

它的原理:從可疑的細(xì)胞培養(yǎng)體系中取樣,接種到適宜支原體生長(zhǎng)的瓊脂平板上。如果樣本中含有支原體,它們就會(huì)在這種瓊脂平板上瘋kuang生長(zhǎng),最終形成明顯可見(jiàn)的特征性菌落。

它的優(yōu)點(diǎn):在選用合適培養(yǎng)基以及合規(guī)要求操作下,這種方法很少會(huì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果,檢測(cè)精確度很高,因此被譽(yù)為支原體檢測(cè)金標(biāo)準(zhǔn)。

它的缺點(diǎn)也比較明顯,操作時(shí)間太長(zhǎng),至少30天才能出結(jié)果,滿足不了大多數(shù)質(zhì)檢部門的要求。無(wú)法檢測(cè)出死亡的支原體。



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